Questa immagine mostra un uomo in piedi con una croce di fronte a un gruppo di persone sedute per terra. Si tratta della Predicazione di San Giovanni Battista che apre il secondo libro di quest'opera. Con il Secondo Libro iniziano le immagini dedicate alla vita adulta di Cristo. All’inizio viene presentato enfaticamente il personaggio di Giovanni Battista, mediatore di Cristo. Dopo aver vissuto a lungo nella solitudine del deserto, il Battista vede radunarsi intorno a sé una folla di fedeli. Le persone sono suggestionate dalle sue parole e lo identificano come un profeta. Le due scene della vita del Battista iconograficamente più rappresentate sono la Predica e il Battesimo dei Neofiti. In questa illustrazione, Giovanni è in piedi davanti a una folla di persone che lo ascoltano. È rappresentato con il suo classico attributo: la croce astile circondata da un cartiglio con la scritta «Ecce agnus dei». Nel 1535, sulle pareti dell’Oratorio di San Giovanni Decollato a Roma, Jacopino del Conte aveva dato spazio a una rappresentazione di questo tema dove i seguaci che circondano Giovanni sembrano ammaliati da lui. Nell’affresco il gesto della mano del Battista è reso in maniera molto enfatica.